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小鼠臭氧暴露對照實(shí)驗方案
一、實(shí)驗目的
研究不同濃度臭氧(O?)暴露對小鼠的生理影響,設置低、中、高三個(gè)臭氧暴露組及對照組,觀(guān)察臭氧暴露的生物學(xué)效應。
小鼠臭氧暴露對照實(shí)驗方案
二、實(shí)驗設備清單
1. 臭氧發(fā)生與暴露系統
- 臭氧發(fā)生器(可精確調控濃度,UV-M2臭氧發(fā)生器)
- 動(dòng)態(tài)暴露艙(分區設計,獨立控制)
- 臭氧濃度監測儀(實(shí)時(shí)檢測并記錄濃度3S-J5000)
- 空氣過(guò)濾系統(用于對照組清潔空氣供應)
 
2. 環(huán)境控制設備
- 溫濕度監控儀(維持穩定實(shí)驗環(huán)境)
- 氣流調節裝置(確保均勻暴露)
- CO?/O?監測儀(保障動(dòng)物福利)
 
3. 動(dòng)物飼養與管理設備
- 獨立通風(fēng)籠具(IVC系統,SPF級)
- 生物安全柜(用于動(dòng)物操作)
- 電子天平(稱(chēng)量動(dòng)物體重)
 
4. 樣本采集與分析設備
- 解剖器械(手術(shù)剪、鑷子等)
- 離心機(用于血液/組織樣本處理)
- 酶標儀(ELISA檢測炎癥因子)
- 病理切片機(組織學(xué)分析)
- 生化分析儀(檢測氧化應激指標)
 
三、實(shí)驗方法
1. 實(shí)驗動(dòng)物與分組
- 使用指定小鼠
- 隨機分為4組(n=10/組):
  - 對照組:過(guò)濾清潔空氣,Nh/天
  - 低濃度組:100 μg/m³ O?,Nh/天
  - 中濃度組:200 μg/m³ O?,Nh/天
  - 高濃度組:400 μg/m³ O?,Nh/天
 
2. 臭氧暴露流程
1. 系統校準:
   - 使用臭氧檢測儀校準各暴露艙濃度
   - 調整臭氧發(fā)生器輸出至目標濃度(100/200/400 μg/m³)
 
2. 每日暴露程序:
   - 將小鼠轉移至暴露艙,連接監測系統
   - 持續通入設定濃度的臭氧/清潔空氣(12小時(shí))
   - 暴露結束后返回標準飼養環(huán)境
 
3. 環(huán)境監測:
   - 每2小時(shí)記錄臭氧濃度、溫濕度
   - 確保對照組空氣無(wú)臭氧污染
 
3. 樣本采集與處理
- 體重監測:每周稱(chēng)量記錄
- 血液采集:尾靜脈取血或心臟穿刺
- 組織取樣:
 
4. 檢測指標
- 氧化應激指標:SOD、MDA、GSH-Px
- 炎癥因子:IL-6、TNF-α(ELISA法)
- 病理分析:肺組織HE染色
 
四、注意事項
1. 嚴格校準臭氧濃度,避免組間交叉污染
2. 對照組空氣需經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾(HEPA)
3. 實(shí)驗期間保持光照周期一致(如12h光照/12h黑暗)
4. 所有操作符合動(dòng)物倫理規范
 
本方案可根據具體研究需求調整檢測指標和暴露時(shí)長(cháng)。建議預實(shí)驗確定暴露周期。

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